CLONING AND EXPRESSION OF Brucella melitensis ZINC PROTEASE GENE تنسيـل مـورثة الزنک بروتـياز والتعبـير عنهـا لدى البروسيـلا الضـأنيـة

Zaiter, Dana; Ali, Dina; Al Balaa, B.; Al Mariri, A.; Hamad, Ebtsam

doi:10.21608/jacb.2010.88803

CLONING AND EXPRESSION OF Brucella melitensis ZINC PROTEASE GENE تنسيـل مـورثة الزنک بروتـياز والتعبـير عنهـا لدى البروسيـلا الضـأنيـة

Document Type : Original Article

Authors

¹ Dept. of Plant Biology, Fac. of Science, Damascus University, Syria

² Dept. of Animal Biology,Fac. of Science, Damascus University, Syria

³ Department of Molecular Biology and Biotechnology, Atomic Energy Commission of Syria (AECS), Damascus, Syria

⁴ Department of Environmental Science- Damascus University- Syria

10.21608/jacb.2010.88803

Abstract

تمَّ عزل ومضاعفة مورثة الزنک بروتياز بواسطة الـPCR باستخدام الـDNA المُستخلص من جينوم البروسيلا الضأنية . صُمم زوج من المرئسات لهذه المورثة يحويان مواقع التقييد لأنزيمي NdeI و BamHI في النهايتين 5’ و3’ على التوالي. حيث استخدمت تلک المرئسات في مضاعفة شدفة بطول 927 pb. هُضِـمت الشدفة وأُدخلت ضمن بلازميد التعبـير pET-15(b) المقطوع بنفس الأنزيمات، أدخـل البلازميد المؤشب فيما بعد ضمن بکتريا الـ Escherichia coli BL21 (DE3) للتعبـير عن بروتين الزنک بروتياز. تبين بعـد ساعتين من الحث بتراکيز مختلفة من IPTG ، أن التعبير عن هذا البروتياز حرّض الموت الخلوي البکتيري.

Keywords