Zaiter, D., Ali, D., Al Balaa, B., Al Mariri, A., Hamad, E. (2010). CLONING AND EXPRESSION OF Brucella melitensis ZINC PROTEASE GENE تنسيـل مـورثة الزنک بروتـياز والتعبـير عنهـا لدى البروسيـلا الضـأنيـة. Journal of Agricultural Chemistry and Biotechnology, 1(3), 169-176. doi: 10.21608/jacb.2010.88803
Dana Zaiter; Dina Ali; B. Al Balaa; A. Al Mariri; Ebtsam Hamad. "CLONING AND EXPRESSION OF Brucella melitensis ZINC PROTEASE GENE تنسيـل مـورثة الزنک بروتـياز والتعبـير عنهـا لدى البروسيـلا الضـأنيـة". Journal of Agricultural Chemistry and Biotechnology, 1, 3, 2010, 169-176. doi: 10.21608/jacb.2010.88803
Zaiter, D., Ali, D., Al Balaa, B., Al Mariri, A., Hamad, E. (2010). 'CLONING AND EXPRESSION OF Brucella melitensis ZINC PROTEASE GENE تنسيـل مـورثة الزنک بروتـياز والتعبـير عنهـا لدى البروسيـلا الضـأنيـة', Journal of Agricultural Chemistry and Biotechnology, 1(3), pp. 169-176. doi: 10.21608/jacb.2010.88803
Zaiter, D., Ali, D., Al Balaa, B., Al Mariri, A., Hamad, E. CLONING AND EXPRESSION OF Brucella melitensis ZINC PROTEASE GENE تنسيـل مـورثة الزنک بروتـياز والتعبـير عنهـا لدى البروسيـلا الضـأنيـة. Journal of Agricultural Chemistry and Biotechnology, 2010; 1(3): 169-176. doi: 10.21608/jacb.2010.88803
CLONING AND EXPRESSION OF Brucella melitensis ZINC PROTEASE GENE تنسيـل مـورثة الزنک بروتـياز والتعبـير عنهـا لدى البروسيـلا الضـأنيـة
1Dept. of Plant Biology, Fac. of Science, Damascus University, Syria
2Dept. of Animal Biology,Fac. of Science, Damascus University, Syria
3Department of Molecular Biology and Biotechnology, Atomic Energy Commission of Syria (AECS), Damascus, Syria
4Department of Environmental Science- Damascus University- Syria
Abstract
تمَّ عزل ومضاعفة مورثة الزنک بروتياز بواسطة الـPCR باستخدام الـDNA المُستخلص من جينوم البروسيلا الضأنية . صُمم زوج من المرئسات لهذه المورثة يحويان مواقع التقييد لأنزيمي NdeI و BamHI في النهايتين 5’ و3’ على التوالي. حيث استخدمت تلک المرئسات في مضاعفة شدفة بطول 927 pb. هُضِـمت الشدفة وأُدخلت ضمن بلازميد التعبـير pET-15(b) المقطوع بنفس الأنزيمات، أدخـل البلازميد المؤشب فيما بعد ضمن بکتريا الـ Escherichia coli BL21 (DE3) للتعبـير عن بروتين الزنک بروتياز. تبين بعـد ساعتين من الحث بتراکيز مختلفة من IPTG ، أن التعبير عن هذا البروتياز حرّض الموت الخلوي البکتيري.